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液相自動(dòng)進(jìn)樣器的操作調(diào)節(jié)方法

更新時(shí)間:2018-08-25      點(diǎn)擊次數(shù):1197
     液相自動(dòng)進(jìn)樣器的故障容易被發(fā)現(xiàn),有時(shí)液相色譜儀系統(tǒng)出了故障而不能確定是否是進(jìn)樣器故障,可以用手動(dòng)進(jìn)樣幾次,或用一臺(tái)好的液相自動(dòng)進(jìn)樣器代替,如排除了故障,說(shuō)明液相自動(dòng)進(jìn)樣器有了問(wèn)題。不同廠商的液相自動(dòng)進(jìn)樣器差異很大,除一些共性故障外,較好查閱操作手冊(cè)。  
    除液相自動(dòng)進(jìn)樣器機(jī)械、控制系統(tǒng)可能出現(xiàn)故障外,在操作及方法學(xué)方面也可能出現(xiàn)相應(yīng)的問(wèn)題,這里主要根據(jù)液相自動(dòng)進(jìn)樣器的設(shè)計(jì)特點(diǎn),對(duì)試驗(yàn)過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行說(shuō)明。  
一、滯后體積  
    液相色譜儀中滯后體積是指流動(dòng)相混合器到柱頭的體積,包括溶劑混合器和混合器到柱頭之間連接管的體積,對(duì)于低壓混合系統(tǒng),也包括泵體積。滯后體積較大可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性差、方法移植困難。通常的HPLC系統(tǒng)中,滯后體積一般在0.2mL~5mL之間,主要取決于裝置的設(shè)計(jì)。  
    滯后體積中較重要的部分為液相自動(dòng)進(jìn)樣器的定量環(huán)體積。只有定量環(huán)體積小于100μL時(shí),其對(duì)滯后體積的影響才可以近似不計(jì)。當(dāng)定量環(huán)體積較大時(shí),這種影響將表現(xiàn)出來(lái)。例如,采用50μL的定量環(huán)時(shí)滯后體積為300μL,如果改用1mL定量環(huán),滯后體積將變成1250μL,這種變化直接影響到色譜分離結(jié)果。在實(shí)際分離過(guò)程中,采用的色譜柱較細(xì)時(shí),必須考慮滯后體積的影響,解決的辦法為更換較小的定量環(huán),減小滯后體積。  
二、樣品瓶過(guò)滿  
    如果樣品瓶過(guò)滿,在瓶蓋較緊、進(jìn)樣量較大的情況下,可能會(huì)導(dǎo)致進(jìn)樣重復(fù)性變差。其原因?yàn)闃悠菲恐械臉悠繁怀槌鰰r(shí),蓋緊的瓶蓋不能使空氣及時(shí)進(jìn)入,造成部分真空。由于這種真空作用,注射器不能夠吸取足夠量的樣品體積。在的情況下,對(duì)于揮發(fā)性稀溶液樣品,針內(nèi)甚至?xí)霈F(xiàn)氣泡,影響分析工作的正常進(jìn)行。  
    有些液相自動(dòng)進(jìn)樣器采用加排空針的方法克服這一問(wèn)題,但這種方法并不常用。較簡(jiǎn)單的解決辦法為不要使樣品瓶過(guò)滿。一般裝樣量在樣品瓶的1/2到3/4之間較為適宜。  
三、進(jìn)針深度的調(diào)節(jié)  
    樣品量足夠多時(shí),不必考慮這一問(wèn)題。但對(duì)于痕量分析而言,進(jìn)針深度的調(diào)節(jié)問(wèn)題將較為突出。理想的情況下可以使進(jìn)針深入到接近樣品瓶底部,這樣可以較大限度地利用樣品。當(dāng)可用的樣品體積有*,可以采用微量樣品瓶以增加給定體積樣品的相對(duì)深度。如果進(jìn)針過(guò)深,可能插入樣品瓶的底部,甚至導(dǎo)致針尖阻塞。如果進(jìn)針深度不足,樣品只及針尖部分,針將不能抽取足夠量的樣品,部分空氣取而代之。  
    對(duì)于進(jìn)針深度的調(diào)節(jié),一般采用機(jī)械或電動(dòng)的方法,目前大部分廠商可以在液相色譜儀色譜工作站上設(shè)置。無(wú)論采用哪種方法,實(shí)驗(yàn)之前都必須認(rèn)真調(diào)節(jié),更換樣品瓶類型時(shí)還需要重新調(diào)整。
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